1. 유세포 분석(Flow Cytometry) 방법은 세포 하나하나가 가지는 세포 고유의 여러 가지 특성을 Laser와 형광을 이용하여 분석하는 장비이다. 유세포 분석 은 한번에 여러 변수(특성)을 분석할 수 있다. 2. 유세포 분석기는 특정 형광이 label되어 있는 Anti-body를 이용해 세포의 면역학적 특성을 분석할 뿐 아니라 세포의 물리적 특성(사이즈와 Granularity), 생화학적 그리고 생리학적 특성을 분석 할 수 있으며, 그 적용분야는 세포 내 특정 단백질 발현 분석부터 염색체 분석, 세포 수 분석, GFP(Green Fluoresc ence Protein)발현 분석에 이르기까지 광범위하다.
장비구성 및 성능
Ⅰ. 장비의 구성
1. 유세포 분석기 장비 본체 1 세트
2. 분석장비 전용 컴퓨터와 듀얼모니터 1 세트
3. 분석전용 소프트웨어 2 팩
Ⅱ. 성능 및 규격
1. 유세포 분석기 장비 본체
1) 레이저(광원) 시스템
I. 레이저 구성
i. 고체 형의 2극 진공(다이오드) 블루 레이저, 488파장, 50mW 레이저 출력
ii. 고체 형의 2극 진공(다이오드) 레드 레이저, 638파장, 50mW 레이저 출력
II. 플로우 셀: 180 x 420 크기의 직사각형 수정(석영)
III. 집광(collection optics): 1.3NA 렌즈로 구성
IV. 광학 필터
i. 전반 빛 산란 감지 필터: 488/8
ii. 블루 레이저 필터 & 형광 염료: 520/40, 585/42, 610/20 & FITC,
AlexaFluor488, CFSE, Fluo-3, PE, PI, PC5, PC5.5, PerCP, PerCP-Cy5.5,
iii. 레드 레이저 필터 & 형광 염료: 660/20, 712/25, 780/60 & APC, AlexaFluor647, eFluor660,
V. 광학 검지기(수신기)
i. 전방 빛 산란 검지기(수신기)
ii. 측방 빛 산란 검지기(수신기): 300nm
iii. 형광 검지기(수신기): FL1~FL4 형광 검지기. 빛 스펙트럼들의 감도 범위(185nm-900nm)
2) 시험 과정
I. 유체 속도(샘플 분석 속도): 샘플 튜브에 지속적으로 가해지는 압력은 사용자가 선택한
유체 속도(샘플 분석 속도)에 맞게 조절되어야 한다. (저속, 중속, 고속)
II. 환충 액 소모량: 샘플 분석(획득): 10ml/min
III. 샘플 간 교차오염 확률(평균): 1% 미만
IV. 분석 용기: 12 x 75mm 튜브, 1.5mL, 2.0mL 튜브
V. 샘플 혼합 : 샘플 튜브는 샘플 분석전 자동으로 mixing하도록 디자인 되어 있음
3) 신호(결과값, 데이터) 처리 체계
I. 다이내믹(역학) 범위: 24-bit 데이터 획득
II. 해상도: 16,777,216 channels
III. 디지털 샘플링 속도: 25MHz
IV. 변수(파라미터)
i. 각각의 검지기(수신기)에서 10개의 서로 다른 종류의 신호를 얻을 수 있다:
신호 적분(인데그랄)값의 직선 및 로그 단위, 신호 피크 값의(peak) 직선 및 로그 단위,
신호 전달 시간의(time of flight) 직선 값
ii. 시간, 비율
4) 장비 성능 특성
I. 빛 산란 감지기(Scatter) 해상도: 지름 0.3 마이크로 미터의 미립자를 측방 빛 산란
감지기(Forward scatter)에서 노이즈(noise)와 분리가 가능하고 최대 지름 40마이크로 크기의
입자까지 분석 가능
II. 형광 감도 역치 값:
FITC < 30 MESF PE < 10 MESF
III. 분석 률(속도): 초당 30,0
장비사용예
1. 세포의 면역학적 특성, 세포의 물리적 특성(사이즈와 Granularity), 생화학적 그리고 생리학적 특성 분석
2. 동물실험을 통한 약리 활성 성분의 세포 조절 유전자 발굴 및 분석
3. 림프구 아형검사(Lymphocyte immunophenotyping), Recticulocyte Counting, Immuno Complex Analysis 등에 사용
